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ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，其表面積越大，填充柱的柱效超高；然而粒度越小，柱壓越大，柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應用。在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是因素。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%；然而，3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時，柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱...

高效液相色譜是一種廣泛使用的分析分離技術(shù)，用于定量、鑒定和分離非揮發(fā)性液體混合物的成分。HPLC色譜柱里面有各種孔徑的“填料”，稱為“固定相”。經(jīng)過孔的樣品被稱為“流動相”。當流動相到達固定相時，大分子會被較小的孔截攔，從而使較小的分子可以更快更好地洗脫，這就是分離過程。這導致較小分子具有更快的保留時間，分子在色譜柱中停留的時間越長，色譜圖上的峰越寬。溶劑過濾器是化學實驗室常用的裝置，主要應用于高效液相色譜流動相過濾、粒子物質(zhì)分析和微生物污染檢測等，也是化學實驗室常備器材。恒...

反相色譜是迄今在高效液相色譜中應用較廣泛的技術(shù)，主要是因為它適用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì)，因此，分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的，含有疏水的機制也能以同樣的保留方式分離。反相色譜柱利用各種流動相和添加物可以有很多的應用，一些技術(shù)利用添加物可以改變或修飾填料的表面，有時候這些添加物有可能會污染鍵合相表面。硅膠表面因為有著疏水鍵合相而有一些別的化學性質(zhì)，殘留的硅烷醇存在于所有的硅膠鍵...

一、導致高基線和變化基線的流動相雜質(zhì)：雜質(zhì)在流動相中高度溶解的特定情況下，它們不會被色譜柱截留，并有助于在整個色譜圖中產(chǎn)生高于正常的檢測器信號。使用梯度洗脫時，如果雜質(zhì)僅存在于梯度中使用的一種溶劑中，則檢測器信號可能會緩慢變化并且與在任何時間點對流動相有貢獻的溶劑比例有關(guān)。流動相雜質(zhì)不會表現(xiàn)為看起來像典型色譜峰的信號特征，因此它們不會直接與分析物峰本身發(fā)生沖突。但是如果雜質(zhì)的物理化學性質(zhì)與分離中的目標分析物相似，則雜質(zhì)可以表現(xiàn)為基線中看起來像典型峰的特征。有時這些被稱為“鬼峰...

一：色譜柱的問題色譜柱會因不同的品牌都會有對應的清洗要求，可以查找色譜柱的說明書或者查找資料和請教有經(jīng)驗的色譜工作者進行操作，否則盲目操作有可能會造成色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短。如果發(fā)現(xiàn)柱內(nèi)條件變化了，需要穩(wěn)定進樣條件,調(diào)節(jié)流動相。不少做色譜實驗的技術(shù)人員平時可能也會碰上這樣的一個問題：如果不及時補充流動相，泵會將溶劑瓶中的流動相吸干了會不會影響色譜柱呢？答案是不會的！因為泵里面充滿了空氣，但是泵也不會將空氣排入色譜柱的，泵只傳送液體不傳送空氣。恒譜生液相色譜柱采用不...

c18反相色譜柱是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據(jù)溶質(zhì)極性(疏水性)的差別進行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。與HIC一樣，RPC中溶質(zhì)也通過疏水性相互作用分配于固定相表面，但是，RPC固定相表面*被非極性基團所覆蓋，表現(xiàn)出強烈的疏水性。因此，必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進行溶質(zhì)的洗脫分離。c18反相色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照C4反相色譜柱出廠報告...