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使用HPLC純化綠茶中的多酚

更新時間:2022-07-23      點擊次數:2125

      綠茶被廣泛認為是地球上最健康的飲料之一。縱觀歷史,綠茶一直被用作治療多種疾病的民間療法,今天它繼續被提倡作為補充和替代藥物,雖然它一直備受爭議。現代研究并沒有消除這些長期存在的假設,而是讓人們相信綠茶相關的健康益處。

       綠茶的藥用特性源自茶樹種,廣泛歸因于該植物的高酚含量。使用高效液相色譜法 (HPLC) 進行的研究發現,在干葉和芽中含有豐富的多酚,這些天然植物化合物構成了一系列代謝組(兒茶素、類黃酮、單寧等),但廣泛的 HPLC 分析突出了一種代謝物,特別是在涉及綠茶對人類健康益處的問題時。

       一、用 HPLC 測量多酚含量:

       茶多酚是綠茶的主要代謝物之一。盡管多酚的作用機制仍不清楚,但 EGCG 越來越多的與降低膽固醇有關,并被認為具有抗生素和抗癌特性。然而,它的功效仍有待商榷,因為 EGCG 在生理條件下表現出較差的穩定性和低吸收率 – 占新鮮葉子質量的不到 25%。

       雖然富含多種多酚,但相對較低的 EGCG 濃度尤其推動了對高純度提取物的需求,消費者可以將其用作補充劑和補充治療,并具有一系列據稱的健康益處。制備型 HPLC 已證明有助于滿足對基于高純度 EGCG 提取物的優質膳食補充劑不斷增長的需求。

反相色譜柱-DSC_9326

       二、測定成分:

       通過質量觸發分離法從綠茶中純化表沒食子兒茶素沒食子酸酯和其他相關多酚。使用制備HPLC系統,使用質量觸發分餾,在短時間內將該目標分子與其他三種多酚化合物分離。該技術將分數減少到最小。

        兒茶素是多酚代謝產物,可以作為膳食補充劑購買,但在植物中也是如此。這些分子來自黃酮類,綠茶中含量高。由于其抗氧化性能,我們提出了一種簡單省時的方法。

       三、材料和方法:

       采用恒譜生C18柱 150 x 20 mm,是用于 HPLC 和 UHPLC 的經典反相色譜柱。最常以反相模式使用的固定相。C18 硅膠柱可帶或不帶封端。典型的封端相比未封端的相更具疏水性和非極性。

c18柱-DSC_9324

        非常適用于反相模式下的酸性、堿性和中性分析物,例如:

磺胺類藥物

合成代謝類固醇

抗精神病藥

Β 受體阻斷藥

酚類

防腐劑

       方法使用液相系統以18.9 ml/min的流速運行50 min,得到一個階躍梯度,即降低成分:0 min 10%B,40 min 10%B,40.1用于從綠茶中分離多酚。15%B,50分鐘15%B,0。1%甲酸溶于水(A)和乙腈(B)作為洗脫液。將制備型HPLC系統的波長設置為220 nm,數據速率為10 Hz。表沒食子兒茶素沒食子兒茶素的大規模定向純化。



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